→ Пцр диагностика сколько дней делается. ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции. Какие инфекции позволяет выявить ПЦР диагностика

Пцр диагностика сколько дней делается. ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции. Какие инфекции позволяет выявить ПЦР диагностика

При подозрении на воспалительные заболевания мочеполовой сферы врачом урологом-андрологом проводятся различные исследования для определения возбудителя заболевания и дальнейшего подбора соответствующего антибактериального лечения.

Мазок на флору: врач определяет возбудителя инфекции (например, передаваемой половым путем)при помощи микроскопа.

Если проводится микроскопия с подсветкой, то метод называется иммунофлюоресцентным.

Бактериологическийпосев – основан на исследовании биологического материала пациента (моча, кровь, кал), который помещается в специальную среду. В результате размножения микроорганизмов можно легко обнаружить возбудителя инфекции. Такой способ очень удобен для выявления бактерий и грибов. Но в данном случае срок получения результата довольно большой – до 5-7 дней. К тому же есть вероятность, что микроорганизм не вырастет в созданных условиях, что также повлияет на результат анализа.

ДНК-диагностика(ПЦР) – самый точный из методов биологической диагностики.

Особенно актуален при диагностике инфекций, передаваемых половым путем (ИППП).

ДНК-диагностику проводят методом полимеразной цепной реакции или ПЦР. Для этого из биологического материала извлекается часть ДНК микроба. Риск ошибки при использовании данного метода составляет не более 3%. Кроме того, этот способ диагностики не только точен, но и позволяет быстро получить результаты в течение 1-3 дней. К тому же, этот метод применим к более широкому спектру микробов и подходит для выявления вялотекущих и скрытых инфекций.

Чаще всего этот метод используют урологи и гинекологи для определения наличия хламидий, гонококков, различных видов микоплазм, уреаплазм, трихомонад, вируса герпеса, цитомегаловируса, вируса папилломы и прочих инфекций.

ПЦР – это полимеразная цепная реакция. Позволяет лабораторным методом определить наличие половых инфекций у мужчин и женщин, даже если концентрация возбудителя минимальна. Достоверность метода 97-99%.

В качестве материала для обследования используют чаще всего соскоб из уретры (мочеиспускательный канал). Также определяют микроорганизм из физиологических жидкостей: кровь, эякулят (сперма), секрет простаты. После забора материала он в кратчайшие сроки доставляется в лабораторию. Там лаборант выделяет все ДНК (генетический материал) и сравнивает с нормальной ДНК пациента и микроорганизмов, вызывающих половые инфекции.

Выявить заболевание уже можно при наличии 100-105 клеток в 1 мл материала.

Однако результат может быть не только положительный и отрицательный.

Ложноположительный результат бывает при несоблюдении стерильности при заборе материала и при его исследовании, а также при уже пройденном лечении, когда ДНК микроорганизмов еще не вывелась, а сами возбудители уже не жизнеспособны.

А ложноотрицательный результат встречается в том случае, если концентрация микроорганизмов очень мала и тест-системы не способны почувствовать их наличие.

Микроорганизмы, к которым чувствителен метод ПЦР диагностики:

  • трихомонада,
  • хламидия,
  • микоплазма,
  • гонококк,
  • гарднерелла,
  • уреаплазма,
  • ВПЧ (вирус папилломы человека),
  • вирус Эшптейн-Барра,
  • вирус герпеса,
  • цитомегаловирус,
  • токсоплазма.

Состояния, когда проводится ПЦР диагностика:

  • Обследование на заболевания передающиеся половым путем,
  • Профилактическое обследование после случайного полового контакта,
  • Наличие выделений из половых путей,
  • Обнаружение инфекций у полового партнера,
  • Планирование беременности,
  • Зуд, дискомфорт, жжение в уретре,
  • Выделения из уретры,
  • Бесплодие,
  • Положительный результат посева и его микроскопии.

Как подготовиться к исследованию?

  • 1-2 суток перед визитом к врачу для сдачи анализов воздержаться от половых контактов;
  • Перед сдачей мазка на половые инфекции рекомендуется не мочиться в течение 2 часов.
  • Накануне анализа рекомендуется провести провокацию. Самым простым и наиболее надежным методом считается алиментарная провокация (алкоголь, соленое, острое).
  • Накануне анализа употребляется алкоголь и острая пища – например, одна-две бутылки пива с чем-нибудь солененьким или копченым.

Как проводится взятие мазка на ЗППП?

Во время осмотра врач уролог-андролог с помощью специальной небольшой одноразовой щеточки (зонда) берет материал для исследования у мужчин из мочеиспускательного канала. В определенных случаях на ПЦР берется секрет простаты или эякулят (сперма).

Сколько дней готовиться забор ПЦР на половые инфекции?

Один рабочий день (если анализ сдан до с 8.30 до 11.00).

Как оценивается результат мазка на ЗППП?

У здорового человека все инфекции должны отсутствовать.

Что делать, если в анализе мазка на половые инфекции выявлены положительные результаты?

С результатами анализа обратиться к лечащему врачу (урологу-андрологу).

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Суть иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в выявлении специфических (индивидуальных для каждого микроорганизма) антител.

Антитела (иммуноглобулины, Ig) - специфические белки-защитники, вырабатываемые лейкоцитами (белыми кровяными тельцами) в ответ на появление в организме чужеродного генетического материала (вирусов, бактерий, простейших).

Иными словами, данные иммуноферментного анализа (ИФА) показывают не факт наличия инфекционного агента (инфекции) в организме, а состояние иммунитета к этому инфекционному агенту, т.е на основании данных ИФА можно лишь опосредованно (косвенно) судить о наличии /отсутствии инфекционного агента (вирусов, бактерий, простейших) по ответной реакции на него иммунной (защитной) системы организма.

В зависимости от срока давности существования в организме человека вирусов, бактерий, простейших вырабатываются антитела классов А, M, G (IgА, IgM, IgG).

Иммунноферментный анализ (ИФА) в урологии и андрологии широко используют для диагностики микоплазмоза, уреаплазмоза, трихомоноза, гарднереллеза, гонореи, TORCH-инфекций (токсоплазмы, краснухи, цитомегаловирусной инфекции и герпеса).

В случае низкой иммуногенности инфекционного агента (инфекции) либо недостаточной активности иммунной системы выработка антител (иммуноглобулинов классов А, M, G) может отсутствовать или быть диагностически незначимой при фактическом (реальном) наличии инфекционного агента (инфекции) в организме по данным полимеразной цепной реакции (ПЦР). Слабой иммуногенностью (способностью существовать незаметно для иммунной системы) обладают микоплазмы, уреаплазмы, трихомонада.

В ряде случаев данные иммуноферментного анализа (ИФА) могут быть ложноположительными, т.е. при фактическом отсутствии инфекционного агента (инфекции) в организме иммуноферментный анализ (ИФА) определяет наличие антител к нему. Высокая частота ложноположительных реакций часто отмечается при диагностике методом ИФА трихомоноза (трихомониаза).

Низкой иммуногенностью инфекционного агента (бактерий, вирусов, простейших) и индивидуальными особенностями иммунитета человека объясняется кажущееся противоречие данных ИФА и ПЦР, при котором исследование методом ИФА не находит инфекцию, а метод ПЦР свидетельствует о наличии инфекции в организме.

Таким образом, диагностика инфекционных заболеваний, включая инфекции, передаваемые половым путем, требует комплексной (совокупной) оценки данных всех диагностических методов.

Как сдать кровь на ИФА

  • Кровь сдается в процедурном кабинете больницы утром натощак. Между последним приемом пищи и взятием крови должно пройти не менее 8–12 часов. За 1–2 дня исключить из рациона жареное, жирное, алкоголь.
  • Накануне исследования (в течение 24 часов) исключить физические нагрузки.
  • За час до взятия крови воздержаться от курения.

ПСА – PSA

Простатический специфический антиген

Простатический специфический антиген (ПСА, PSA) – это один из важнейших диагностических признаков заболеваний предстательной железы. Он представляет собой вещество белковой природы, которое выделяется клетками предстательной железы.

Функция ПСА (PSA) в норме заключается в разжижении спермы после семяизвержения. Большая часть ПСА (PSA) выводится из организма мужчины спермой, однако очень незначительная часть его попадает в кровь, что определяется с помощью особых тестов. Ввиду крайне малых концентраций этого вещества в крови, для его определения применяются очень чувствительные методы – техника моноклональных антител.

Пса может находится в крови как в свободном виде, так и в связанном. Общая концентрация ПСА (PSA) определяется путем суммирования свободного и общего ПСА (PSA) . В норме содержание ПСА (PSA) в крови составляет около 4 нг/мл. Однако, в связи с тем, что предстательная железа с возрастом увеличивается и продуцирует тем самым больше ПСА (PSA) , обычно уровень его у молодых бывает ниже, а у пожилых мужчин – выше. Так, возрастные характеристики концентрации ПСА (PSA) таковы: (40 - 49, 2.5), (50 - 59, 3.5), (60 - 69, 4.5), (70 - 79, 6.5).< Тест на ПСА (PSA) используется в двух значениях:

  • для диагностики рака предстательной железы
  • для контроля течения рака предстательной железы

При выполнении диагностического теста ПСА (PSA) уровень его выше 4 нг/мл и ниже 10 нг/мл считается подозрительным в плане рака простаты. В большинстве случаев, однако, у мужчин с таким уровнем ПСА (PSA) в крови не обнаруживается рак предстательной железы. При уровне ПСА (PSA) выше 10 нг/мл вероятность обнаружения рака простаты растет.

Тест ПСА (PSA), проводимый для контроля течения рака предстательной железы, применяется для выявления рецидива рака после первичного лечения. Например, при полном удалении предстательной железы и всех тканей, пораженных метастазами, уровень ПСА (PSA) падает до нуля. Если при последующем тесте на ПСА (PSA) он становится положительным, это означает, что в организме остались ткани, пораженные раком.

Другие причины повышения уровня ПСА (PSA)

  • аденома предстательной железы
  • пожилой возраст
  • инфекция (простатит)

Кроме того, уровень ПСА (PSA) весьма чувствителен к всевозможным инструментальным манипуляциям в отношение предстательной железы: катетеризации мочевого пузыря, массажу простаты, биопсии простаты и т.д.

Что такое ложноположительный тест ПСА (PSA)?

Тест на ПСА (PSA) считается ложноположительным, когда повышение уровня ПСА связано с другими причинами, а не раком предстательной железы. К ним относятся простатит и аденома предстательной железы. Также следует отметить, что даже простое пальцевое ректальное исследование простаты или эякуляция в течение последних 48 часов может иногда давать ложноположительные результаты теста ПСА (PSA). Обычно, тест ПСА (PSA) бывает ложноположительным в 4 – 10 % случаев, но иногда он достигает и 30 %! Другие заболевания, не относящиеся к предстательной железе, не могут давать положительные результаты теста ПСА (PSA).

Чувствительность теста ПСА (PSA) весьма высокая. Это связано с тем, что практически у всех больных с раком простаты уровень ПСА (PSA) повышен либо находится в пограничных пределах. Однако, положительный тест ПСА (PSA) не исключает других заболеваний, то есть специфичность данного заболевания низкая.

Мужские половые гормоны или андрогены, - специфические химические вещества, которые влияют на деятельность всех органов, систем и процессов в организме человека.

Тестостерон - основной мужской половой гормон, который присутствует как у мужчин, так и у женщин.

Значение и влияние тестостерона тяжело переоценить. В любом организме он должен быть: норма его для мужчин и женщин отличается, но без него здоровое половое развитие невозможно.

Связанный + свободный тестостерон = общий тестостерон

Общий тестостерон состоит из:
Общий тестостерон состоит из:

  • 2% гормона в свободном (несвязанном) состоянии;
  • 44% гормона, связанного глобулином (ГСПГ);
  • 54% - с альбуминами и другими белками.

Основная часть главного мужского полового гормона - в связанном состоянии. Свободный и связанный с альбумином гормон биологически активен. ГСПГ же замедляет его действие.

Свободный тестостерон у мужчин - активная форма гормона. Его дефицит приводит к импотенции. Он определяет развитие вторичных половых признаков и половое влечение.

У мужчин чаще всего развивается дефицит гормона в активной форме. Он приводит к тому, что:

  • мышечная и костная ткань становится менее плотной;
  • нарушается углеводный и жировой обмен;
  • развиваются кардиологические и психоэмоциональные расстройства.

Как сдать анализ на тестостерон правильно

Чтобы сдать кровь на этот гормон и получить достоверные результаты, важно накануне не употреблять алкоголь и исключить курение. Что касается еды, то за 12 часов до сдачи анализа нельзя есть, а пить - только простую воду.

Полимеразная цепная реакция известна уже 30 лет. Ее широко используют во многих областях, начиная с археологии и заканчивая генетикой. Именно метод пцр помогает установить отцовство, но наиболее часто его используют для выявления различных инфекционных болезней в организме человека. Что же из себя представляет анализ методом пцр?

Это ни что иное как имитация процесса размножения ДНК, в результате чего из крошечного фрагмента молекулы ДНК в течение некоторого времени (обычно хватает нескольких часов) получают огромное количество идентичных молекул, которые уже можно изучать. Вам это ничего не напоминает? Очень похоже на клонирование. Именно полимеразная цепная реакция является основой клонирования и применяется при воспроизводстве тканей в лабораторных условиях. Ну, а в медицине анализ пцр используют для выявления в организме человека бактерий (микоплазм, , , а также возбудителей и ), вирусов (, и папилломавируса), грибов (возбудителей ) и простейших (трихомонады).

Данный метод молекулярной диагностики инфекционных возбудителей является наиболее чувствительным. Позволяя обнаружить даже единственный фрагмент ДНК в образце, метод пцр практически не имеет предела чувствительности. И в большинстве случаев его результат показывает 100% точность, особенно при диагностике бактериальных инфекций. Он никогда не дает ложноположительных результатов.

Также он является универсальным, так как позволяет выявить одновременно несколько микроорганизмов в одной пробе, в то время как бактериологические методы используют разные способы культивирования для разных групп возбудителей. Кроме того, пцр существенно облегчает задачу исследователей, сокращая время на проведение теста до 24 часов и упрощая требования к транспортировке образцов. Если материал для бактериологических и вирусологических методов должен быть живым, то для метода пцр подходит все, что содержит ДНК, даже мертвые клетки.

Анализ пцр на инфекции крайне важен потому, что большинство из них, поражая организм человека, развиваются бессимптомно или имеют схожие признаки. Так например, метод пцр широко применяют для выявления причин заболеваний печени, среди которых А, В, С, D, Е, а также вирус простого герпеса. Для борьбы с каждым из вирусов необходимо применять совершенно различные тактики лечения. Поэтому для назначения эффективной терапии врачу нужно точно выявить возбудителя. А если проводить затяжные исследования, инфекция может перейти в хроническую форму, вызвав осложнения, которые особо опасны при беременности или других сопутствующих заболеваниях. И именно метод пцр является главным помощников в быстрой и точной диагностике.

Но здесь нужно понимать, что являясь чуть ли ни единственным методов выявления одних микроорганизмов (например, микоплазмы), пцр может совершенно не подходить для других (стафилококков, стрептококков, , и т.д.) Поэтому выбирать методы диагностики и назначать лечение должен специалист. Самостоятельно отправляться в лабораторию и делать все анализы подряд не стоит. Они могут оказаться абсолютно бесполезными. А в частных клиниках по Вашему желанию и за Ваши деньги Вам проведут любые анализы, даже не поинтересовавшись, зачем они Вам нужны.

Как берут анализ пцр

Для проведения исследований методом пцр используют биологические жидкости и выделения человеческого организма, в которых могут содержаться микробы и их фрагменты. К ним относятся: кровь, слюна, мокрота и моча. Кроме того, для анализа пцр берут соскобы эпителиальных клеток слизистой оболочки уретры и цервикального канала. Например, для выявления вируса ВИЧ и гепатита берут кровь из вены. Для диагностики инфекций половых органов анализируют выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала. А для диагностики инфекционного мононуклеоза используют мазок из зева.

Подготовка к пцр анализу

Перед сдачей анализа нужно проконсультироваться с врачом и тщательно следовать его рекомендациями. Спросите у доктора, какие именно материалы будут брать для исследования. Анализ крови пцр сдают натощак. А вот перед тем, как сдавать анализ пцр в виде соскобов эпителиальных клеток, врачи рекомендуют пациентам вечером выпить пива, сходить в баню и заняться сексом. Звучит странно, но все это активизирует инфекцию в половых органах, которая может протекать в очень слабой форме, и помогает ее выявить.

Расшифровка пцр анализа

Результат анализа пцр может быть положительным и отрицательным. Это всегда отмечают в документе, который в обязательном порядке должны выдать в лаборатории. Положительный результат означает, что в биологическом материале, который сдал пациент, были обнаружен ДНК инфекции. Отрицательный результат означает отсутствие инфекции в организме человека.

Так как метод пцр обладает высокой чувствительностью, использовать его для контроля эффективности лечения нужно очень осторожно и только спустя несколько недель после проведенной терапии. Ведь даже фрагмент ДНК мертвого возбудителя даст положительный результат анализа пцр.

Полимеразная цепная реакция помогает врачам диагностировать инфекции, которые протекают в организме человека в скрытой форме, не допуская их развития и сильного поражения внутренних органов. Внимательно следите за состоянием своего здоровья и при первых подозрениях на наличие у Вас инфекции обращайтесь к доктору.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее.

КОНСУЛЬТАЦИЯ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ АНАЛИЗОВ или УЗИ - 500 руб.

Метод ПЦР был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют , или . А нализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

  • гепатит C, B;
  • уреаплазмоз половых органов;
  • – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
  • хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
  • бактериальный вагиноз;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • туберкулез;
  • сальмонеллез;
  • туберкулез (легочные и внелегочные формы);
  • листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
  • , папилломавирусную, ;
  • детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — , паротит, дифтерию, корь;
  • ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее. Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих. Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК. Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов. Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

  • Универсальность . Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
  • Специфичность . ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
  • Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
  • Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
  • Возможность проведения количественного анализа . Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

  • Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
  • Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
  • С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут мазок из влагалища . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

  • За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
  • За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
  • За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
  • Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
  • За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

  • За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
  • Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
  • Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
  • Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

  • Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
  • Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
  • Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
  • Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
  • Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

  • Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
  • Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
  • Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
  • Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
  • Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
  • Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии;
    соскобы и мазки со слизистых для диагностики ЗППП;
    клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других. Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.



ПЦР-реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор. При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

  • Отрицательный результат . Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
  • Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится. Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился. Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

  • Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
  • Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
  • Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

Диагностика инфекционных заболеваний – бактериальных и вирусных – направлена на раннее выявление возбудителей, что позволяет назначать раннюю и максимально эффективную терапию. Самым современным способом диагностики инфекций является ПЦР или полимеразная цепная реакция. Так что же это за метод, и для чего он нужен?

Суть полимеразной реакции

Любой микроорганизм и вирус содержат в своей структуре молекулы ДНК или РНК. У каждого из них эти соединения уникальны, поэтому, если выделить в анализе крови у детей или взрослых нуклеиновые кислоты, можно с абсолютной точностью поставить диагноз.

К сожалению, концентрация ДНК в образцах крови или других биологических материалах достаточно низка и с помощью обычных методов диагностики определить ее не получается. Чтобы справиться с этой проблемой, была изобретена полимеразная цепная реакция.

Сущность ПЦР заключается в специальной обработке образца крови, в результате чего в ней увеличивается концентрация ДНК молекул, определение типа которых в дальнейшем позволяет установить вид возбудителя и поставить диагноз.

Как сдать кровь на ПЦР

При подготовке к анализу следует придерживаться общих рекомендаций: не пить и не есть непосредственно перед анализом крови. Хотя для сдачи крови на ПЦР можно так строго не придерживаться этих требований, так как точность исследования не зависит от того, на сытый или голодный желудок был взят анализ.

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР

С помощью ПЦР можно выявить практически любые вирусные и бактериальные заболевания. Для анализа используется не только кровь, но и другие биологические материалы: сперма, слюна, мазки из уретры и с шейки матки. Анализ крови будет информативен в том случае, если возбудитель конкретного заболевания проникает в кровь человека. Поэтому ПЦР крови назначают при следующих заболеваниях:

  • вирусные гепатиты А, В, С, D и TT;
  • цитомегаловирус;
  • герпетическая инфекция (вирусы герпеса 1, 2 и 4-го типов);
  • ВИЧ-инфекция
  • энтеровирусная инфекция;
  • опоясывающий лишай;
  • краснуха;
  • токсоплазмоз;
  • инфекционный мононуклеоз;
  • листериоз.

Если же взять во внимание возможность проведения ПЦР других биоматериалов, то в список заболеваний, выявляемых с помощью ПЦР, следует добавить:

  • гарднереллез;
  • сальмонеллез;
  • (порядка 100 различных штаммов вируса папилломы человека);
  • трихомониаз;

Особо актуально в настоящее время ПЦР анализа крови беременной на так называемые : цитомегаловирус, токсоплазмоз, краснуху и . Связано это с тем, что упомянутые заболевания могут привести к аномалиям развития плода.

Преимущества ПЦР

Недостатки анализа

ПЦР является высокотехнологичным методом исследованием и предъявляет высокие требования к оснащению лаборатории. Помещение, где делают анализ, обязательно должно быть оснащено фильтром биологической очистки, так как в воздухе постоянно присутствуют частицы кожи, слюны, содержащие в своем составе молекулы ДНК. Несоблюдение техники работы с биоматериалами может стать причиной неверного результата.

Анализ крови – расшифровка у взрослых (ПЦР)

Трактовка результатов этого исследования не представляет сложностей, потому что отсутствует таблица норм анализа крови на ПЦР. В бланке результатов могут фигурировать лишь две фразы:

  • отрицательный результат – возбудитель, на который проводился анализ, не выявлен;
  • положительный результат – в организме имеется возбудитель указанного заболевания.

Следует знать, что ПЦР может быть положительной даже при отсутствии клинических симптомов заболевания! Расшифровка анализа крови на ПЦР у детей не отличается от таковой у взрослых.

Кому нужно сдать анализ на ПЦР

Любой человек может сдать кровь для исследования. Прямым показанием для исследования является подозрение на инфекции передающиеся половым путем ( , гарднереллез, ВИЧ-инфекция). При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. В обязательном порядке кровь на TORCH-комплекс сдают беременные женщины. А также женщины, только .

Анализы на ПЦР назначаются во многих случаях. Очевидно, что в современных условиях способна дать самый точный ответ – имеет ли пациент инфекционную составляющую в организме, или нет. Для использования ПЦР методики необходим биологический материал, который и забирается у пациента по назначению лечащего врача.

Как правильно сдавать мазок, анализы на ПЦР? Перед мазком нельзя подмываться, надо сходить в туалет за 3 часа до процедуры. Есть и другие тонкости.

Инфекционные ЗППП, гепатиты, мононуклеоз – все мы стараемся избегать этих заболеваний. Если появились сомнения, например, после незащищенного полового акта, не стоит «прятать голову в песок», лучше сходить к врачу и провериться. Скорее всего, доктор вас попросит сдать анализы на ПЦР.

Если расшифровать аббревиатуру ПЦР, то получится «полимерная цепная реакция». Это самый простой способ обнаружить инфекцию. Для анализов берут различные биологические материалы и проверяют их на наличие чужеродных ДНК, которые принадлежат возбудителям болезни. Благодаря этому анализу можно определить, что за болезнь у пациента, а также узнать количество вредных микроорганизмов, находящихся в организме человека.

Что показывают анализы на ПЦР? Результат анализа ПЦР может быть или отрицательным, т.е. никаких инфекций в организме нет, или положительным. Если он подтверждает наличие инфекции, то врач сможет точно сказать, какая именно инфекция присутствует и в каком количестве.

Какой именно биологический материал берут на анализ? Все зависит от того, какой диагноз хочет опровергнуть или подтвердить специалист. Если нужно диагностировать гепатит или ВИЧ, то берут анализ крови. При подозрении на мононуклеоз – мазок из зева. Чаще всего проверяют наличие половых инфекций, а для этого делается мазок из шейки матки, исследуются выделения из половых органов у женщин, берется мазок из мочеиспускательного канала у мужчин. Или же пациент сдает мочу.

Поговорим более подробно о том, как получить достоверный анализ ПЦР, как сдавать его.

Как сдавать анализы

Как мы уже говорили, врач может попросить сдать для исследования различный биологический материал, поэтому подготовка к процедуре зависит от того, на что именно вы проверяетесь.

Сдача слюны, мочи, спермы

Если специалист берет на анализ слюну, то перед процедурой нельзя есть и принимать лекарства как минимум 4 часа. Перед тем, как сдать анализ, наберите в рот кипяченой воды, чтобы прополоскать его.

Если доктор попросил сдать мочу, то нужно брать только утреннюю. Перед тем, как собрать мочу на анализ, необходимо тщательно подмыться. Чтобы материал был чистым, без посторонних примесей, женщинам во влагалище лучше вставить тампон, а мужчинам постараться оттянуть кожную складку. В контейнере должно быть не менее 50-60 мл мочи.

Если берут на анализ сперму у мужчин, то перед ее сдачей он должен воздерживаться от половых контактов как минимум 3 дня. Также в это время не стоит посещать сауну, принимать горячую ванну, употреблять спиртные напитки, есть острую пищу. Важно перед тем, как сдать анализ, как минимум 3 часа не ходить в туалет, т.е. воздержаться от мочеиспускания.

Если врач попросил сдать кровь, то это делается утром, натощак. Перед этим не стоит увлекаться жирной пищей и пить алкогольные напитки.

 

 

Это интересно: